Phakopsora pachyrhizi has dispersed globally and brought severe economic losses to soybean growers. The fungus has been established in Brazil since 2002 and is found nationwide. To gather information on the temporal and spatial patterns of genetic variation in P. pachyrhizi , we sequenced the nuclear internal transcribed spacer regions (ITS1 and ITS2). Total genomic DNA was extracted using either lyophilized urediniospores or lesions removed from infected leaves sampled from 26 soybean fields in Brazil and one field in South Africa. Cloning prior to sequencing was necessary because direct sequencing of PCR amplicons gave partially unreadable electrophoretograms with peak displacements suggestive of multiple sequences with length polymorphism. Sequences were determined from four clones per field. ITS sequences from African or Asian isolates available from the GenBank were included in the analyses. Independent sequence alignments of the ITS1 and ITS2 datasets identified 27 and 19 ribotypes, respectively. Molecular phylogeographic analyses revealed that ribotypes of widespread distribution in Brazil displayed characteristics of ancestrality and were shared with Africa and Asia, while ribotypes of rare occurrence in Brazil were indigenous. The results suggest P. pachyrhizi found in Brazil as originating from multiple, independent long-distance dispersal events.

Cercospora kikuchii está envolvido na desfolha da soja (Glycine max), normalmente em associação com Septoria glycines, no final do ciclo da cultura. Setenta e dois isolados, obtidos principalmente de sementes com mancha púrpura e oriundas de diferentes regiões do Brasil, mostraram variabilidade fenotípica. O teor de cercosporina e a velocidade de crescimento de colônias foram bastante variáveis entre os isolados. Uma forte correlação foi identificada entre o teor de cercosporina e virulência. Diferenças genéticas, entre e dentro da população analisada, foram observadas por RAPD com a análise de 86 loci. As análises de RAPD permitiram agrupar os isolados em sete grupos. Nenhuma relação foi identificada entre os grupos de RAPD e a origem geográfica ou teor de cercosporina. A sequência da região espaçadora do DNA ribossomal (ITS1-5,8S-ITS2) foi determinada em 13 isolados escolhidos nos diferentes agrupamentos. A similaridade das sequências obtidas comparadas às sequências de C. kikuchii depositadas no GenBank (AY266160, AY266262, AY152577 e AF291708) variou de 97 a 100%. Este trabalho demonstrou que os isolados brasileiros de C. kikuchii de diferentes origens são variáveis quanto à virulência, aos padrões de RAPD e ao teor de cercosporina. O teor de cercosporina pode ser um bom parâmetro na escolha de um isolado adequado para seleção de cultivares tolerantes ou resistentes a esse patógeno. Considerando que ele é facilmente transmitido por sementes não é surpresa encontrar os mesmos haplotipos em diferentes regiões. A migração poderia ser favorecida por sementes infetadas como demonstrado na análise de RAPD.

Cercospora kikuchii, involved with the defoliation of soybean (Glycine max) plants, is normally associated with Septoria glycines in late season. Seventy-two isolates from different regions in Brazil, obtained mainly from purple stained seeds, showed phenotypic variation. Cercosporin content and rate of colony growth was higly variable among isolates. A strong correlation between cercosporin content and virulence was identified. Genetic variation among and within populations was evaluated based on 86 RAPD loci. The RAPD analysis clustered all isolates into seven groups. No relationship was observed between RAPD groups and geographic origin or cercosporin content. The sequence of the internal spacer regions (ITS1-5.8S-ITS2) from 13 isolates chosen according to the previous RAPD and clustering analysis showed high similarity (97%-100%) to the GenBank sequences of C. kikuchii (AY266160, AY266161, AY152577 and AF291708). It is clear from this work that Brazilian isolates of C. kikuchii from different geographic regions, are variable in relation to virulence, RAPD profiles and cercosporin content. Cercosporin content could be a good parameter for choosing an adequate isolate for screening resistant or tolerant cultivars. Considering that this pathogen is easily seed-borne, findings are expected to show the same haplotypes in different regions. Migration could be favoured by infected seeds as demonstrated by RAPD analysis.

Um vírus foi isolado de plantas de soja (Glycine max) cultivadas em Wenceslau Braz, Estado do Paraná, com sintomas de nanismo e queima do broto. O vírus foi caracterizado por meio de hospedeiros diferenciais e propriedades biológicas como sendo um isolado do Tobacco streak virus (TSV). O vírus purificado apresentou três picos em gradiente de sacarose congelado. Anti-soro produzido contra o vírus foi sorologicamente relacionado ao TSV. Microscopia eletrônica detectou partículas esféricas com 28 nm de diâmetro. A proteína do capsídio (PC) apresentou massa molecular de 29.880 Da. Um fragmento de 1028 nt foi amplificado, clonado e seqüenciado. Uma ORF com 717 nt foi identificada e associada com a PC, a qual compartilha 83% de identidade com a seqüência da PC do isolado de TSV de trevo branco (Trifolium repens) (GenBak CAA25133). Este é o primeiro relato da caracterização biológica e molecular de um isolado de TSV de soja. Propõe-se que o isolado seja considerado uma estirpe do TSV denominada TSV-BR.

A virus was isolated from soybean (Glycine max) plants with symptoms of dwarfing and bud blight in Wenceslau Braz County, Paraná, Brazil. The host range and properties resembled those of Tobacco streak virus (TSV). The purified virus showed three peaks in a frozen sucrose gradient. Antiserum was produced and the virus was serologically related to TSV. Electron microscopy detected 28 nm spherical particles. Coat protein (CP) had a Mr of 29.880 Da. A fragment of 1028 nt was amplified, cloned and sequenced. One open reading frame with 717 nt was identified and associated to the CP. The CP gene shared 83% identity with the sequence of TSV CP from white clover (Trifolium repens) (GenBank CAA25133). This is the first report of the biological and molecular characterization of TSV isolated from soybeans. It is proposed that this isolate be considered a strain of TSV named TSV-BR.

No ano agrícola de 2000/2001, ocorreu um surto de nanismo e necrose da haste em soja (Glycine max) plantada em duas áreas do Brasil Central e na safra seguinte, esta anomalia foi constatada em outras regiões produtoras, mesmo distantes mais de 2.000 km de onde fora inicialmente constatada. Estudos envolvendo ensaios de transmissão (enxertia, mecânica e insetos vetores), microscopia eletrônica, purificação, sorologia e ensaios moleculares indicaram que a enfermidade foi causada por um carlavirus transmitido por mosca branca, possivelmente relacionado ao Cowpea mild mottle virus (CpMMV).

Stunting and stem necrosis were noticed in soybeans (Glycine max) grown in 2000/2001 in West Central Brazil the same condition was also observed in the following year in plantations as far as 2,000 km from the initial area. Based on transmission (mechanical, graft, insect vector), purification and serology, electron microscopy and molecular studies the causal agent was determined to be a whitefly-borne carlavirus which is possibly related to Cowpea mild mottle virus (CpMMV).

Em lavouras de feijoeiro (Phaseolus vulgaris) da cultivar Carioca Comum, no município de Londrina, Estado do Paraná, foram encontradas plantas com sintomas de necrose da haste, mosaico clorótico leve e porte reduzido, semelhantes aos sintomas causados por infecção viral. Exames de microscopia eletrônica revelaram a presença de partículas isométricas. Em testes de imunodifusão dupla em gel de ágar os extratos foliares de plantas infetadas reagiram positivamente com anti-soro específico para o Southern bean mosaic virus (SBMV). O vírus foi purificado e a massa molecular de sua proteína capsidial foi estimada em 30 kDa, valor esperado para proteínas do capsídeo de vírus do gênero Sobemovirus. A gama de hospedeiras do SBMV isolado no Paraná foi restrita ao feijoeiro e a algumas cultivares de soja (Glycine max). A separação de dois vírus isométricos comuns em infecções mistas no feijoeiro foi possível através da reação de imunidade ao SBMV apresentada por Crotalaria sp, Chenopodium quinoa e Mucuna deeringiana, e da reação de susceptibilidade dessas mesmas hospedeiras ao Bean rugose mosaic virus (BRMV).

Plants of bean (Phaseolus vulgaris), showing symptoms of stunt, stem necrosis and chlorotic mosaic, similar to those induced by virus infection were found in a bean field in Londrina, Paraná. Electron microscopy examinations showed isometric virus particles in the cell cytoplasm. Double immunodifusion serological tests with antiserum for Southern bean mosaic virus (SBMV) gave positive results when tested against plant sap from infected bean plants. The virus was purified and the molecular mass of its coat protein was estimated as 30 kDa, the expected value for the coat protein of viruses from the genus Sobemovirus. The host range of the virus was restricted to bean and some soybean (Glycine max) cultivars. It was possible to separate two isometric viruses commonly found in bean based on the immunity reaction of Crotalaria sp., Chenopodium quinoa and Mucuna deeringiana to SBMV, and on the susceptibility reaction of the same hosts to Bean rugose mosaic virus (BRMV).

Este estudo objetivou determinar os efeitos, em duas cultivares de soja (Glycine max), causados por duas estirpes do Soybean mosaic virus (SMV) e da idade das plantas na inoculação em relação a parâmetros ligados ao rendimento. Dois experimentos foram conduzidos em casa de vegetação, nos quais as cultivares BRS 183 e UFV-16 Capinópolis foram inoculadas, mecânica e isoladamente, com as estirpes G1 e G5 do SMV, em três diferentes idades após a emergência. Os experimentos foram instalados segundo um delineamento inteiramente casualizado com cinco repetições. Foram avaliados diferentes características relacionadas à produção e qualidade de grãos e constatou-se que: (i) as duas estirpes causam danos sobre diferentes características ligadas ao rendimento e manchas nas sementes; (ii) a estirpe G1 é mais severa que a estirpe G5; (iii) a idade da planta na inoculação do SMV afeta o nível de danos; (iv) a porcentagem de sementes manchadas e o grau de mancha ocorrem com diferentes intensidades de acordo com o ambiente, cultivar, estirpe e idade da planta na inoculação. As características em cada combinação de peso de matéria seca e peso de grãos, peso de raiz e volume de raiz, porcentagem de sementes manchadas e grau de manchas, apresentaram correlações significativas nas duas cultivares, permitindo que se faça opção por apenas uma característica de cada combinação, para avaliar as perdas em plantas infetadas.

The objective of this study was to determine the effects on the yield of two soybean cultivars caused by two strains of Soybean mosaic virus (SMV) and of the age of plants at the moment of inoculation. Two experiments were conducted in a greenhouse. Plants of the cultivars BRS 183 and UFV-16 Capinópolis were mechanically inoculated with strains G1 or G5, at three different ages. The experiments were conducted in a completely randomized design, with five replications. Differents characteristics related to yield and seed quality were evaluated. The conclusions were: (i) the two SMV strains cause significant losses in soybean yield and seed quality; (ii) the SMV G1 strain causes more losses than the G5 strain; (iii) plant age at inoculation affects the level of losses; (iv) the percentage of mottled seeds and the level of mottle in seeds were affected by the environment, cultivar, virus strain and age of plants at the moment of inoculation. The characteristics of each combination, plant dry weight and seed weight, root weight and volume, percentage of mottle seeds and level of mottling, showed a significant correlation in both cultivars, thus allowing the use of one characteristic from each pair to evaluate losses.

Macrophomina phaseolina é considerado como um dos fungos mais prevalecentes em infecções radiculares de soja, no Brasil. Nenhuma fonte de resistência genética foi ainda encontrada. Além disso, nenhuma informação foi obtida quanto à variabilidade genética deste patógeno, em regiões tropicais. Cinqüenta e cinco isolados de raízes de soja (Glycine Max), obtidos de diferentes regiões geográficas, foram analisados por RAPD para avaliação da diversidade genética. Análise de agrupamento (UPGMA), utilizando 74 loci, permitiu identificar três grupos, com uma média de 99%, 92% e 88% de similaridade genética, respectivamente. Os três grupos correspondem a 5,45%, 59,95% e 34,6% de todos os isolados utilizados. Apenas uma planta estava infetada por três diferentes haplotipos, enquanto 10,9% de todas as plantas estavam infetadas por haplotipos pertencentes a dois diferentes grupos. Em outro estudo a similaridade genética foi determinada entre isolados originários de diferentes hospedeiros [soja, sorgo (Sorghum bicolor), girassol (Helianthus annuus), caupi (Vigna unguiculata), milho (Zea mays) e trigo (Triticum aestivum)] e de duas amostras de solo de áreas virgens. Os resultados mostraram que isolados mais divergentes são oriundos de áreas com monocultura. Amplificação da região ITS produziram apenas um fragmento com 620 pb. Nenhum dos isolados foi diferenciado quando o produto amplificado por PCR foi digerido com enzimas de restrição. Os resultados demonstram a existência de variabilidade genética entre os isolados brasileiros de M. phaseolina e mostram que uma única raiz pode ter mais de um haplotipo. Além disso, a rotação de cultura induz menos diversidade genética entre os isolados. O conhecimento dessa variabilidade pode ser útil na seleção de genótipos resistentes à podridão de carvão.

Macrophomina phaseolina has been considered one of the most prevalent soybean (Glycine max) pathogens in Brazil. No genetic resistance has been determined in soybean and very little is known about the genetic diversity of this pathogen in tropical and sub-tropical regions. Fifty-five isolates from soybean roots were collected in different regions and analyzed through RAPD for genetic diversity. The UPGMA cluster analysis for 74 loci scored permitted identification of three divergent groups with an average similarity of 99%, 92% and 88%, respectively. The three groups corresponded to 5.45%, 59.95% and 34.6%, respectively of all isolates used. A single plant had three different haplotypes, while 10.9% of the analyzed plants had two different haplotypes. In another study the genetic similarity was evaluated among isolates from different hosts [soybean, sorghum (Sorghum bicolor), sunflower (Helianthus annuus), cowpea (Vigna unguiculata), corn (Zea mays) and wheat (Triticum aestivum)] as well as two soil samples from native areas. Results showed that more divergent isolates originated from areas with a single crop. Isolates from areas with crop rotation were less divergent, showing high similarity values and consequently formed the largest group. Amplification of the ITS region using primers ITS1 and ITS4 produced only one DNA fragment of 620 bp. None of the isolates were differentiated through PCR-RFLP. Our results demonstrated genetic variability among Brazilian isolates of M. phaseolina and showed that one single root can harbor more than one haplotype. Moreover, cultivation with crop rotation tends to induce less specialization of the pathogen isolates. Knowledge of this variation may be useful in screening soybean genotypes for resistance to charcoal rot.

O aumento da incidência da podridão de carvão, causada por Macropphomina phaseolina, em raízes de soja, foi avaliada durante quatro anos, nos sistemas de semeadura direta (SD) e convencional (SC). Em 1997/98 e 2000/01, a precipitação total entre a semeadura, em novembro, e a colheita, em março, foi de 876.3 e 846.9 mm, respectivamente, não havendo diferença significativa entre a incidência na SD e SC. Em 1998/99 e 1999/00, a precipitação observada foi de 689.9 e 478.3 mm, respectivamente. Em 1998/99, a incidência final nos sistemas de SD e SC foi de 43,7% e 53,1%, respectivamente. Em 1999/00, a incidência final foi de 68,7% e 81,2%. Nesses dois anos, considerados secos (precipitação pluviométrica < 840 mm), as médias de incidência entre os dois sistemas de semeadura foram significativamente diferentes (P=0,05%). A concentração de microesclerócios de raízes e de solo, coletados à profundidade de 0-10 cm em SD e SC, mostrou resultados diferentes. Amostras de solo de SC sempre apresentaram maior concentração de microesclerócios do que amostras de SD (P=0,05%). No entanto, amostras de raízes não apresentaram a mesma resposta. Em anos secos, a concentração foi maior na soja do SC. Não houve diferença em anos com boa precipitação. Devido ao grande número de plantas hospedeiras e à sobrevivência dos microesclerócios no solo, não se acredita que a rotação de culturas seja adequada no controle dessa doença. Entretanto, a manutenção de umidade, favorecida pelo sistema de SD, parece reduzir o progresso da doença, favorecendo o controle do fungo.

The increase in incidence of charcoal rot caused by Macrophomina phaseolina on soybeans (Glycine max) was followed four seasons in conventional and no-till cropping systems. In the 1997/98 and 2000/01 seasons, total precipitation between sowing and harvest reached 876.3 and 846.9 mm, respectively. For these seasons, disease incidence did not differ significantly between the no-till and conventional systems. In 1998/99 and 1999/00 precipitation totaled 689.9 and 478.3 mm, respectively. In 1998/99, in the no-till system, the disease incidence was 43.7% and 53.1% in the conventional system. In 1999/00 the final incidence was 68.7% and 81.2% for the no-till and conventional systems, respectively. For these two seasons, precipitation was lower than that required for soybean crops (840 mm), and the averages of disease incidence were significantly higher in the conventional system. The concentration of microsclerotia in soil samples was higher in samples collected in conventional system at 0 - 10 cm depth. However, analysis of microsclerotia in roots showed that in years with adequate rain no difference was detected. In dry years, however, roots from plants developed under the conventional system had significantly more microsclerotia. Because of the wide host range of M. phaseolina and the long survival times of the microsclerotia, crop rotation would probably have little benefit in reducing charcoal rot. Under these study conditions it may be a better alternative to suppress charcoal rot by using the no-till cropping system to conserve soil moisture and reduce disease progress.

Nas áreas produtoras de feijão (Phaseolus vulgaris) do Estado do Paraná observa-se anualmente a ocorrência do vírus do mosaico em desenho do feijoeiro (Bean rugose mosaic virus, BRMV), principalmente em infecções mistas com o vírus do mosaico dourado do feijoeiro (Bean golden mosaic virus, BGMV), acarretando maior severidade de sintomas e causando perdas na produção. Recentemente constatou-se a presença do vírus do mosaico severo do caupi (Cowpea severe mosaic virus, CPSMV) associado a sintomas de queima do broto em plantações de soja (Glycine max) na região de Londrina, sendo este um fato novo no Estado. Neste trabalho, parte do RNA2 de dois comovirus isolados de soja no Paraná foram clonados e sequenciados, sendo 600 pares de bases (pb) do BRMV-PR e 594 pb do CPSMV-PR. Posteriormente, as seqüências correspondentes de aminoácidos foram comparadas com seis seqüências de vírus do gênero Comovirus depositadas no GenBank. Com base nestes dados observou-se que o segmento do RNA2 do isolado CPSMV-PR apresentou homologia de 85% com parte de uma seqüência já conhecida do RNA2 do CPSMV, enquanto que o segmento do RNA2 do isolado BRMV-PR apresentou homologia de 39% com o CPSMV, e de 44% com o Bean pod mottle virus (BPMV). Este trabalho apresenta pela primeira vez dados de sequenciamento parcial do BRMV, o que poderá contribuir para sua completa caracterização molecular e para o estabelecimento de estratégias para obtenção de plantas resistentes ao vírus.

In bean (Phaseolus vulgaris) producing areas of Paraná State, Bean rugose mosaic virus (BRMV) has been found in mixed infections with Bean golden mosaic virus (BGMV) increasing the severity of symptoms and crop losses. The association of Cowpea severe mosaic virus (CPSMV) with bud blight symptoms in soybean (Glycine max) plants was recently observed in Paraná for the first time. In this work RT-PCR products of 600 bp of BRMV-PR RNA2 and 594 bp of CPSMV-PR RNA2 were cloned and sequenced. The amino acid sequences coded by the RNA2 segment from these isolates were compared with sequences of the same RNA2 genomic region of six comovirus species from the GenBank. The CPSMV-PR showed 85% homology with the CPSMV RNA2 from the GenBank. Moreover, the BRMV-PR isolate showed 39 and 44% homology with CPSMV and Bean pod mottle virus (BPMV), respectively. This work shows, for the first time, partial sequencing data for BRMV. This data may be helpful for the complete molecular characterization of this virus and for establishing strategies to obtain virus resistant plants.

Plantas de Senna occidentalis (sin. Cassia occidentalis) com sintomas de mosaico foram coletadas próximas a plantas de soja (Glycine max), com sintomas de mosaico e formação de bolhas no limbo foliar. Amostras dessas plantas foram analisadas por microscopia eletrônica constatando-se a ocorrência de inclusões citoplasmáticas tipo catavento e partículas flexuosas e alongadas, indicando a presença de potyvirus. Estudos adicionais com hospedeiras diferenciais, sorologia e sequência de aminoácidos demonstraram que o vírus era similar ao vírus do mosaico comum da soja (Soybean mosaic virus, SMV). Este isolado, designado SMV-Soc, foi capaz de infetar plantas de girassol (Helianthus annuus), normalmente não infetada pelo SMV. Um fragmento de aproximadamente 1.9 kb, correspondendo à porção 3' do RNA viral (parte da região codificadora da proteína Nib, toda a CP e a 3'NTR) foi amplificado via PCR, clonado e sequenciado. A sequência do gene da capa protéica do SMV-Soc apresentou 98% de identidade com isolados brasileiros do SMV (SMV-B, SMV-L e SMV-FT10). A identidade de nucleotídeos da região 3'-NTR foi de 91, 98 e 99% em relação aos isolados SMVL, SMV-B E SMV-FT10, respectivamente. De acordo com esses resultados o isolado obtido de S. occidentalis foi considerado uma estirpe do SMV, grupo G5 e denominado SMV-Soc. Este é o primeiro relato da ocorrência natural do SMV em plantas dessa espécie e indica seu potencial como hospedeira natural deste vírus, no Brasil.

Plants of Senna occidentalis (sin. Cassia occidentalis) with mosaic symptoms were collected near a soybean (Glycine max) field where some plants exhibited symptoms of mosaic and blistering. A preliminary examination of leaf tissue from diseased S. occidentalis by electron microscopy revealed the presence of pinwheel inclusions as well as long flexuous particles, indicating the presence of a potyvirus. Host range, serology, and amino acid sequence from this potyvirus were similar to those from other Brazilian isolates of Soybean mosaic virus (SMV). The 3'- terminal region of the genomic RNA was cloned and a cDNA sequence of 1.9 kb upstream of the poly (A) tract was determined. The sequence contains a single open reading frame and a 3'- non-translated region (NTR) of 259 bp. The nucleotide sequence of the CP gene of SMV-Soc was 98% identical to that of Brazilian isolates SMV-B, SMV-L, and SMV-FT10. The percentage of nucleotide identity of their 3'-NTR's was 91, 98, and 99% in relation to SMV-L, SMV-B, and SMV-FT10, respectively. In contrast to other Brazilian SMV isolates studied, SMV-Soc was able to infect sunflower (Helianthus annuus). Based on these results, the S. occidentalis isolate was identified as a new strain of SMV belonging to the SMV strain, group G5 and was named SMV-Soc. This is the first report of naturaly occurring SMV infecting plants of S. occidentalis in Brazil, adding this weed as a new source of SMV in the field.

Seleção de genótipos de soja (Glycine max) resistentes à mancha parda foi avaliada em condições de casa de vegetação, inoculando-se plantas de soja com um mês de idade com suspensão de esporos calibrada para 10(6) esporos/ml. A avaliação foi iniciada duas semanas após a inoculação e consistiu em determinar a área abaixo da curva de progresso de lesão, índice de amarelecimento e período necessário para atingir 5% de área foliar necrosada. Nenhum genótipo testado foi imune à mancha parda da soja. No entanto, as cultivares CTS-40, IAS-2, IAS-5, PI PI 230 975 e PI 204 332 exibiram menor porcentagem de área foliar necrosada e apresentaram maior período em dias para atingir 5 % de severidade. Os resultados mostram que o nível de severidade estabelecido baseado no número de dias para atingi-lo é um bom indicador para seleção de genótipos com resistência parcial a Septoria glycines. Os genótipos identificados como tolerantes, neste trabalho, poderão ser utilizados nos programas de melhoramento de soja no Brasil.

Screening of soybean (Glycines max) genotypes resistant to brown spot was performed under greenhouse conditions by inoculating one-month-old plants with a suspension of spores, calibrated to 10(6) spores/ml. Evaluation was based on the area under the lesion progress curves, level of chlorosis, and period to reach 5% severity, starting two weeks after inoculation. No cultivar was resistant to brown spot. However, cultivars CTS-40, IAS-2, IAS-5, PI 230 975, and PI 204 332 exhibited less infected leaf area and a longer period to reach 5% disease severity. The results showed that the level of severity established based on the number of days to reach it is a good indicator for screening soybean genotypes with partial resistance to S. glycines. Genotypes identified as tolerant in this work may be used in soybean breeding programs in Brazil.

Soybean mosaic virus (SMV) is the most prevalent virus on soybeans (Glycine max) throughout the world. It causes mottling on seeds and has been associated with yield reduction. Recently, a new strain (SMV 95-1) was found infecting resistant cultivars, causing dwarfing and systemic necrosis. In a screening test carried out with the strains SMV 95-1 and SMV 95-2 on the germplasm collection, several resistant cvs. Embrapa 60, Embrapa 61, Embrapa 62, Embrapa 66 , Embrapa 133, Embrapa 134, Embrapa 135, and Embrapa 136 were identified as resistant to both strains. The resistant genotypes may serve in future soybean breeding programs in Brazil.

Euphorbia heterophylla, também conhecida como amendoim-bravo ou leiteira, é considerada planta invasora importante em mais de 56 países, inclusive no Brasil, tendo acarretado perdas de até 33 % na cultura da soja. Fenotipicamente, é uma espécie de características variáveis, especialmente em relação ao formato do limbo foliar. Esta variabilidade fenotípica tem sido utilizada para diferenciar e classificar as plantas, sugerindo a vários autores que a leiteira seria, de fato, constituída por diferentes espécies. Para estudar a variabilidade genética a nível de DNA entre plantas de Euphorbia heterophylla, que apresentam folhas morfologicamente diferentes, foram analisadas dez plantas diferentes coletadas em campos de soja, em Londrina/PR. As plantas foram transplantadas para casa-devegetação e o DNA das folhas foi extraído para análise pela técnica de RAPD. Vinte seis diferentes "primers", de dez nucleotídeos de sequência aleatória, geraram total de 102 bandas de DNA, sendo 38 delas polimórficas. A distância genética entre os indivíduos foi calculada em função da presença e da ausência das bandas, variando de 1 a 39% entre plantas. A análise de agrupamento dividiu as plantas em dois grupos, considerando limite de distância relativa de 22%. Os grupos gerados separaram nitidamente as plantas quanto ao formato do limbo foliar (estreito ou arredondado) e quanto á ramificação (densa ou normal).

Euphorbia heterophylla is an important weed affecting the performance of annual and perennial crops. It is native from tropical and subtropical regions in the American continent, and has been detected at high densities in 20 different countries worldwide, and at low densities in other 40 countries. In Brazil, it has been inclued among the ten most important weeds affecting different crops, causing yield losses up to 33% in soybean fields. Phenotypically, this species is extremely variable, especially in relation to leaf shape and size, which can vary among and within populations. This variability suggested to several authors that E. heterophylla was, in fact, formed by different species. To systematize the study of E. heterophylla and to determine if the phenotypic variability correspond to modifications at the DNA level, we analyzed 10 different plants collected in the soybean field in Londrina (Parana, Brazil). The plants were transplanted to the greenhouse and leaf DNA was extracted for RAPD technique analysis. Twenty-six RAPD "primers" different amplified 102 DNA bands, 38 of them being polymorphic. Genetic distances among the individuals were calculated based on the presence (1) or absence (0) of those bands. Cluster analyses divided the plants into two distinct groups considering an upper limit of 22% relative genetic distance. The genetic distances among the plants were between 1 and 39%, in agreement with the variability obseved at the morphological level.